产品货号:
M20250
中文名称:
BsmBI内切酶
英文名称:
BsmB I Endonuclease
产品规格:
1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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BsmB I属于Type IIs型内切酶中的一种,可识别非回文序列,并在识别序列之外进行切割,常用于Golden Gate组装。其在55℃具有最佳切割效果。BsmB I的储存缓冲液中预混了BSA,可增强酶的稳定性,并能与DNA制剂中可能存在的污染物结合。
1活性单位(U)是指在50μL反应体系中,55℃ 1h内完全酶切1μg λDNA所需的酶量。
组分 | 规格 |
BsmB I(10U/μL) | 100μL |
10×BsmB I Buffer | 1mL |
保存:-20℃,有效期2年。
- BsmB I的同裂酶有:Esp3 I,BstGZ53 I,Esp16 I,Esp23 I。
- 不同DNA中的BsmB I酶切位点数量:
λDNA ΦX174 pBR322 pUC57 pUC18/19 M13mp18/19 Adeno2 14 0 1 2 2 1 21 - DNA甲基化修饰对BsmB I酶切影响:
Dam Dcm CpG EcoKI EcoBI 无影响 无影响 序列完全重叠剪切阻断 无影响 序列可能重叠剪切可能受影响
- 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性。
- 限制性内切酶储存缓冲液中的添加剂(如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(如盐、EDTA或乙醇等)相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- DNA酶切流程
- 在冰上按下表配制反应体系:
成分 用量 ddH2O 至50μL 10×BsmB I Buffer 5μL 底物DNA 1μg BsmB I(10U/μL) 1μL 总体积 50μL - DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响BsmB I酶活性。
- 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。
- 55℃孵育15~60min。一般推荐5~10U酶/μg质粒DNA、10~20U酶/μg基因组DNA。如需过夜,请将酶量调整至1U。
- 可选步骤:80℃孵育20min可使酶失活,停止反应。也可通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
- 在冰上按下表配制反应体系:
- 小量反应体系
成分 10μL体系 25μL体系 DNA 0.1μg 0.5μg BsmB I(10U/μL) 0.1μL 0.5μL 10×BsmB I Buffer 1μL 2.5μL ddH2O 至10μL 至25μL - 若总反应体系为10μL,孵育时间不要超过1h,避免蒸发。
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